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上海奧析科學儀器有限公司紫外可見分光光度計UV1700PC測聚乙二醇殘留量測定法

本法系依據(jù)聚乙二醇與鋇離子和碘離子形成復(fù)合物

( 1 : 1 )，用上海奧析科學儀器有限公司紫外可見分光光度計法測定聚乙二醇含量。

測定法取供試品適量，用水稗釋，使蛋白質(zhì)濃度不高

于1 % ,即為供試品溶液。精密量取供試品溶液1. Oml, 加

入0 .5m o l/L髙氣酸溶液5 .0 m l,混勻，室溫放置1 5分鐘，

以每分鐘4000轉(zhuǎn)離心10分鐘。取上清液4ml, 加人氣化鋇

溶液（稱取氣化鋇5g，加水溶解至lOOmDl. Oml和0. lm o l/L

碘溶液(稱取碘化鉀2. O g ,加少量水溶解，然后加碘1.3g,

再加水至5 0 m l,搖勻）0. 5 m l,混勻，室溫反應(yīng)1 5分鐘，照

紫外-可見分光光度法（通則0401)，在波長535nm處測定吸

光度；同時以lm l水代替供試品溶液，同法操作，即為空白

對照。

另精密稱取與供試品中聚乙二醇分子量相同的聚乙二醇

適量，加水溶解，并制成每lm l含聚乙二醇lOO^g的溶液，

即為聚乙二醇對照品貯備液。

取按T；表制備的每lm l含10.50Fg 的聚乙二醇對照品

溶液1 .0 m l,加人0. 5m o l/L高氣酸溶液5 .0 m l,混勻，自

“室溫放置15分鐘” 起，同法操作。

聚乙二醇含量m l - 1 10 20 30 40 50

聚乙二醇對照品貯備液/m l 0. 2 0. 4 0. 6 0. 8 1 .0

約1% 蛋白質(zhì)溶液/m l 0. 2 0. 2 0. 2 0. 2 0. 2

水/m l 1. 6 1. 4 1. 2 1 .0 0. 8

以聚乙二醇對照品溶液的濃度（pg/ml)對其相應(yīng)的吸光

度作直線回歸，將供試品溶液吸光度代入直線回歸方程，計

算出供試品溶液中聚乙二醇含量FC^g/ml) 。

按下式計算：

供試品聚乙二醇含量^ / “ 二^ ^ ” 父忉- 3

式中f .為供試品溶液中聚乙二醇含量，pg/tnl;

n 為供試品稀釋倍數(shù)。

【附注】（1 )整個比色過程應(yīng)在試劑加人后的15.4 5分

鐘內(nèi)完成，否則將要影響結(jié)果。

(2 )本法的靈敏度隨被測聚乙二醇的分子量的增加而

提高。

(3 )1%的蛋白質(zhì)溶液系用不含聚乙二醇的蛋白質(zhì)溶液

配制。

3 2 0 3聚山梨酯80殘留量測定法

本法系依據(jù)聚山梨釀8 0中的聚乙氧基（Polyethoxylated)

和銨鉆硫氰酸鹽反應(yīng)形成藍色復(fù)合物，可溶于二氣甲烷，

用比色法測定聚山梨酯8 0含量。

測定法量取供試品1 .0m l于離心管中，加乙醇-氱化

鈉飽和溶液5 m l,搖勻，以每分鐘3 0 0 0轉(zhuǎn)離心10分鐘，取

上清液，再用乙醇-氣化鈉飽和溶液1 .0m l小心沖洗管壁，

洗液與上清液合并，以每分鐘3 0 0 0轉(zhuǎn)離心10分鐘，上淸液

置55°C水浴中，用空氣吹掃法將其濃縮至0.1.0.5ml，加

lm l水溶解。準確加人二氣甲烷2. 0ml、硫氰鈷銨溶液(稱取

硝酸鉆6.0g、硫氰酸銨40. 0 g ,加水溶解并稀釋至200ml)

3.0ml，加塞，混勻，室溫放置1 .5小時，每15分鐘振蕩1

次，測定前靜置半小時，棄上層液，照紫外_可見分光光度

法（通則0 4 0 1 ) ,在波長620nm處測定下層二氣甲烷液的吸

光度。用二氣甲烷作空白對照。

精密量取聚山梨酯8 0對照品溶液（取聚山梨酯8 0約

lOOmg,精密稱定，加水溶解后置100ml量瓶中，加水稀釋

至刻度）CV1、1CV1、25^x1、50^1, 75^1, 100F1, 加人預(yù)先加

人lm l水的離心管中混勻，準確加人二氣甲烷2.0ml、硫氰

鉆銨溶液3.0ml，加塞，混勻，自“室溫放置1 . 5 小時”

起，同法操作。

以上述聚山•梨酯8 0系列濃度（卜g /m l)對其相應(yīng)的吸光

度作直線回歸，相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.98，將供試品吸光度

代入直線回歸方程，求得供試品聚山梨酯8 0含量(fxg/ml) 。